—— PROUCTS LIST
固相微萃取—?dú)赓|(zhì)聯(lián)用對(duì)小茴香莖中揮發(fā)性成分的分析
小茴香(Foeniculum vulgare Mill)為傘形科植物,主要由莖、籽和葉組成,具有散寒止痛、理氣和胃的功能,用于寒疝腹痛、脘腹脹痛、食少吐瀉等癥[1]。除用作中藥外,小茴香還是重要的香料,如作為包子、餃子等食品的餡料,其揮發(fā)性組分在小茴香的功效中具有重要的作用。
雖然小茴香莖和籽均作為香料或藥物使用,但目前有關(guān)小茴香揮發(fā)性成分的分析報(bào)道集中在小茴香干燥成熟果實(shí)(小茴香籽)上,具體分析方法主要有水蒸氣蒸餾[2-3]、臨界CO2流體萃取[4]、微波輔助萃取[5-6]等,有關(guān)小茴香莖的揮發(fā)性成分報(bào)道則很少。近來(lái),固相微萃取技術(shù)(SPME,Solid Phase Microextraction)因集采樣、吸附、萃取、濃縮、進(jìn)樣于一體,操作時(shí)具有時(shí)間短、樣品少、無(wú)需萃取溶劑、對(duì)被測(cè)樣品選擇性高和重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)而受關(guān)注[7-8]。筆者采用固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用法(SPME/GC-MS)對(duì)小茴香莖和籽中揮發(fā)性成分進(jìn)行分析。
1 材料與方法
1.1 儀器與材料 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC6890/MS5973型,美國(guó)Agilent儀器公司);固相微萃取儀(HP-1510,上海濟(jì)成分析儀器有限公司)和萃取頭(PA,美國(guó)Supelco公司);電子天平(EL303型,梅特勒-托利多儀器有限公司)。小茴香于2013年9月2日采自貴州省遵義市三岔。
1.2 揮發(fā)性成分的固相微萃提取 先稱取干燥粉碎成末的小茴香莖0.4 g放置在5 ml萃取瓶中,然后插入經(jīng)活化的萃取頭(230 ℃下活化3 min)在80 ℃下萃取,45 min后取出萃取頭,直接插入氣相色譜儀進(jìn)樣口(250 ℃)脫附3 min。
1.3 氣相色譜-質(zhì)譜測(cè)定條件
1.3.1 氣相色譜條件。使用Agilent HP5MS彈性石英毛細(xì)管色譜柱(30.0 m×250 μm×0.25 μm);升溫時(shí)從60 ℃開(kāi)始以3 ℃/min升至230 ℃;載氣為高純He,流速0.5 ml/min;采用不分流進(jìn)樣,進(jìn)樣口溫度250 ℃。
1.3.2 質(zhì)譜條件。采用能量70 eV的EI離子源,溫度230 ℃;MS四極桿溫度150 ℃;接口溫度150 ℃;質(zhì)量掃描范圍m/z30500。
1.3.3 譜圖積分參數(shù)。初始峰寬為0.102;初始閥值為13.2。
1.4 數(shù)據(jù)處理 樣品中各揮發(fā)性成分的定性由計(jì)算機(jī)檢索與美國(guó)Wiley7Nist05、NIST05 2種標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)匹配而得,統(tǒng)計(jì)匹配度>90%的揮發(fā)性成分。揮發(fā)性成分的定量分析采用峰面積歸一化法。
2 結(jié)果與分析
按“1.2”和“1.3”方法進(jìn)行試驗(yàn),得到小茴香莖揮發(fā)性成分的總離子流色譜圖(圖1a),從圖1a可以看出,SPME/GC-MS*可以對(duì)小茴香莖揮發(fā)性成分有效富集和分離。對(duì)相似度>90%的成分進(jìn)行統(tǒng)計(jì),
結(jié)果表明(表1),從小茴香莖中鑒別出的揮發(fā)性成分共有22個(gè),涵蓋了醚、酮、酯、烴和
萜等類,具體分布是醚類2個(gè)、萜類15個(gè)、酯類2個(gè)、酮類1
個(gè)、烴類2個(gè);其中,含量高的是反式茴香腦,達(dá)51.61%,其次是dl檸檬烯(16.16%),與吳玫涵等采用水蒸氣蒸餾[2-3]、微波輔助萃取[5-6]、固相微萃取[9]等研究茴香籽揮發(fā)性主要成分的結(jié)果基本相同;此外,其他含量>1%的成分還有1,3,3*基-二環(huán)[2.2.1]庚2醇乙酸酯(6.23%)、大根香葉烯D(5.01%)、乙酸小茴香酯(4.25%)、β法尼烯(366%)、δ3蒈烯(1.90%)、β羅勒烯(1.53%)、愛(ài)草腦(1.34%)等,微量成分(含量<1%的成分)為莰烯、鄰傘花烴等。
為進(jìn)一步確認(rèn)SPME/GCMS對(duì)小茴香莖揮發(fā)性成分的分析結(jié)果,筆者在相同的條件下分析了小茴香籽的揮發(fā)性成分,所得總離子流色譜圖如圖1b所示,所得具體成分一同列入表1中。將小茴香莖與小茴香籽的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比,結(jié)果表明,小茴香莖與籽中檢測(cè)出的揮發(fā)性成分均是22個(gè),其中共有成分11個(gè);小茴香莖與籽的主要成分相同,均是反式茴香腦和dl檸檬烯,但小茴香莖的反式茴香腦含量(51.61%)比小茴香籽的含量低(80.42%);二者的主要成分雖然基本相同,但次要成分相差較大,除愛(ài)草腦、β羅勒烯、L葑酮和γ萜品烯等幾個(gè)共有成分外,其他幾個(gè)如1,3,3*基-二環(huán)[2.2.1]庚2醇乙酸酯、大根香葉烯B、乙酸小茴香酯和β法尼烯等在小茴香莖中檢測(cè)到的成分,在小茴香籽中未檢測(cè)到,且共有成分外的含量差異也較大,說(shuō)明小茴香莖與籽之間次要成分的差異較大;相比于主要和次要成分,微量成分之間的差異更大,大部分微量成分均沒(méi)有共有。
中國(guó)藥典收錄的中藥主要是小茴香籽,是中國(guó)藥典收錄的一味中藥,因此其揮發(fā)性成分的分析成為研究分析的目標(biāo),但小茴香籽在整個(gè)茴香中產(chǎn)量?jī)H為很少的一部分,資源有限;小茴香莖的揮發(fā)性成分分析結(jié)果表明兩者的主要揮發(fā)性成分基本一致而次要及微量成分不同,對(duì)開(kāi)發(fā)利用小茴香莖及小茴香籽的替代使用均具有重要意義。
3 結(jié)論
小茴香莖的揮發(fā)性成分與小茴香籽一樣,主要以反式茴香腦和檸檬烯為主;兩者次要成分之間的差異較大,小茴香莖的次要成分主要是1,3,3*基-二環(huán)[2.2.1]庚2醇乙酸酯(6.23%)、大根香葉烯D(5.01%)、乙酸小茴香酯(425%)、β法尼烯(3.66%)等,微量成分之間的差異更大。